Badanie poziomu prolaktyny wykonuje się w diagnostyce zaburzeń miesiączkowania, niepłodności, mlekotoku, zaburzeń owulacji, podejrzenia gruczolaka przysadki, zaburzeń libido, impotencji u mężczyzn oraz w monitorowaniu leczenia hiperprolaktynemii. Współczesna endokrynologia podkreśla, że podwyższony poziom prolaktyny może być wynikiem stresu, ciąży, karmienia piersią, leków (neuroleptyki, antydepresanty), chorób tarczycy, niewydolności nerek, guzów przysadki. Wskazaniem do badania są także objawy takie jak bóle głowy, zaburzenia widzenia, nieprawidłowe krwawienia z dróg rodnych. Interpretacja wyniku wymaga uwzględnienia stanu klinicznego i innych badań hormonalnych.